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更新時間:2018-02-27      瀏覽次數:2295

魚皮質醇(COR)ELISA檢測試劑盒靈敏度值實驗室

魚皮質醇(Cortisol)ELISA試劑盒

英文名稱:Fish Cortisol ELISA Kit
實驗類型:夾心法
檢測范圍:50 pg/mL – 1600 pg/mL
zui低檢測限:10 pg/mL
應用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養物上清或其它相關液體(本產品僅供實驗室科研及非臨床用途)

實驗原理:
將目標包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入品或標本,其中的目標連接于固相載體上的結合,然后加入微生物化的目標,將未結合的生物素洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。

魚皮質醇(Cortisol)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成96孔配置48孔配置備注
微孔酶標板8孔×12條8孔×6條 無
標準品0.3mL×6管0.3mL×6管
樣本稀釋液6mL3mL
檢測抗體-HRP10mL5mL
20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋
底物A6mL3mL
底物B6mL3mL
終止液6mL3mL
封板膜2張2張
說明書1份1份
自封袋1個1個
 

 

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

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